阳光明媚、和风煦煦的海滩上，几只怪模怪样的猫正在用杠铃、哑铃锻炼身体。与此同时，身着夸张红色泳衣的汤姆抱着一大堆行李和食物陪着妖艳矜持的女友来到海滩，他完全没有注意到正躺在沙滩上晒太阳的杰瑞，一下子将遮阳伞插到杰瑞身上，将其压进沙滩里。杰瑞虽然气愤，不过全然不像跟这个见到女人就智商下降的傻瓜计较。他从沙子里爬出来，另找一个地方晒太阳，可是汤姆总将吃剩下的垃圾扔到杰瑞身上，令小老鼠忍无可忍。刚刚赶跑捣乱的杰瑞，汤姆意外发现女友竟然被体魄强健、正在健身的黑猫...

夜深人静，白日里喧嚣的台球馆变得鸦雀无声。可是，黑漆漆的屋内却还有一张桌子亮着灯。原来顽皮的汤姆趁没人之际偷偷溜了进来大过球瘾，他自信满满，不过球技却不敢恭维，好在是自娱自乐，偶尔耍点小聪明也无可厚非。正当他玩兴正酣时，睡在某个球洞里的杰瑞却受到了打扰。迷迷糊糊的小老鼠险些被从天而降的球砸中脑袋，继而又被挤在两球中间。他弄气冲冲地出去寻找扰民的家伙，结果反落在了汤姆的手中，遭到对方好一阵戏耍。或是被台球列车碾压过去，或是踩着黑8跳火圈。小老鼠疲于奔命，而汤...

在一所大房子内，淘气的大猫杰斯帕正在戏耍棕色的小老鼠金克斯。金克斯拼尽全力，可是始终逃不出杰斯帕的猫爪，真是受尽折磨。在一次猫鼠追逐中，杰斯帕不小心碰碎了走廊拐角的花盆，结果遭到女主人一通训斥。而且一旦他再打碎任何东西的话，就会被无情地赶到外面。得知这一消息，金克斯开始 有意地破坏屋里的瓷器，这可令杰斯帕慌了手脚……

在一个华丽宽广的大庄园内，夜幕降临，庄园房间灯火辉煌。长长的走廊之上，汤姆和杰瑞这对冤家又展开新一轮的追逐战。几番交手，汤姆都没有占到任何便宜。对于这只在贵族家庭里饱受熏陶的贵族猫来说，是可忍孰不可忍，他掏出名刺，宣称要和杰瑞进行一场男人间的决斗。杰瑞毫不退缩，也掏出自己的名刺，两个小家伙就此约好了决斗的日子。镜头一转，在一个萧索荒凉的野外，猫和老鼠各自披着黑色披风面对面站立，他们拿出手枪、击剑、弓箭、大炮、弹弓等各种凶器，展开了一连串的对决。

《猫和老鼠》的故事情节围绕着一对常见的家猫 汤姆和老鼠 杰瑞而展开， 汤姆有一种强烈的欲望，总是不断努力的去捉同居一室的老鼠 杰瑞，并不断地努力驱赶着这位讨厌的房客。在这部 动画中，没有动物世界中恃强凌弱的残酷，只有两个邻居之间的日常琐事和纷争。