故事发生在黑手党出没的意大利。表面上，“社会福祉公社”是一间专门收容孤苦少女的福利院，但在背地里，他们却以杀手为目标训练这些肢体残缺的女孩。他们将少女们洗脑后进行肢体改造和实战训练，经过改造的女孩们，成为了不折不扣的杀人兵器。其中，要数海瑞塔（南里侑香 配音）、莉可（三桥加奈子 配音）、崔耶拉（仙台惠理 配音）、克拉耶斯（小清水亚美 配音）和安琪莉可（寺门仁美 配音）五人最为优秀。每个少女都配有一个年长男性作为辅佐官照顾其生活起居。虽然身份是杀手，但她们对自己的辅佐官都有着深厚的信任和感情。 　　少女们的敌人，是被称为“五共和国派”的恐怖组织，他们为了争取自由独立犯下了不择手段的罪行。少女们无法逃脱死亡的悲伤命运，残酷的战斗中，处处显现出这些无依无靠的“工具”们悲哀的身影。

生死をかけた戦い、哀しきクライマックスの後・・・TV未放送のOVAがリリース決定! 　　「GUNSLINGER GIRL」ファンなら見逃せない、オフストーリー2篇を収録!! 　　【収録話】「ヴェネツィアの光、心の闇」/「ファンタズマ」 　　脚本 相田裕 　　絵コンテ 福冨博 　　演出 高島大輔 　　作画監督 小関雅 　　--------------- 　　【メインスタッフ】 　　◆原作・総監修:相田裕 　　◆総監督:石踊宏 　　◆監督:真野玲 　　◆シリーズ構成:相田裕 　　◆シリーズ構成協力:浦畑達彦 　　◆脚本:相田裕、浦畑達彦 　　◆アニメーションキャラクターデザイン原案:相田裕 　　◆アニメーションキャラクターデザイン・総作画監督:杉光登 　　◆総作画監督:小関雅 川島勝 　　◆銃器総監修:又野弘道 　　◆銃器設定/銃器総作画監督:江田恵一(スタジオロン) 　　◆美術監督:西倉力 　　◆撮影監督:大西博 　　◆音楽:大谷幸 　　◆音響監督:平光琢也 　　◆音響制作:神南スタジオ 　　◆アニメーション制作:アートランド

故事的舞台在现代的意大利，政府机关“社会福祉公社”表面上是收容重伤残障的少女、给予医治和职业训练的福利机构，实际上却是对收容的少女进行义体改造，并投入药物洗脑，使她们成为对抗恐怖份子的尖兵。每位少女都搭配有一位辅佐官，这种组合被称为“fratello”，是意大利语中“兄妹”之意。少女们对辅佐官都具有（制约造成的）混合了爱情及亲情的绝对忠诚。 与社会福址公社敌对的是被称为“五共和国派”的恐怖组织。该组织的政治诉求是响应以意大利北部为据点的“北部同盟”（Lega Nord）党首Umberto Bossi所提倡的，意大利北部8省与中部3省应该自意大利共和国分离独立的主张，并依此实行武装抗争运动（但在现实中的意大利并无此组织，真实存在的北部同盟也不支持恐怖活动）。

OVA第一卷讲述的是莉可与约翰一起去威尼斯执行任务，目标是约翰已故的未婚妻的弟弟，新人物也将陆续登场。 OVA第二卷讲述的是约翰、乔瑟兄弟带海莉艾塔和莉可去度假时所发生的事。

郭庄庙。铁匠出身的张响和猎户女儿李杏花萍水相逢并遭遇日本人的盘问，李杏花的父亲被鬼子当场杀害，自己被鬼子抓住欲行不轨，生性怯懦的张响被日本…

抗日战争时期，猎户女儿李杏花（贾青 饰）亲眼看着父亲被日寇杀害，随后鬼子还企图对她施暴。关键时刻，与她偶然相遇的张响（徐僧 饰）一改往日懦弱，砸死了鬼子，二人一同投奔了抗日队伍。杏花因自幼随父打猎，枪法精湛，和张响、王晓宝（焦博 饰）成了武工队的狙击手。为报杀母之仇，张响独自前往敌据点刺杀日军曹桥本，这让前来执行任务的杏花误以为他投降了敌人。不被信任的张响转而加入了国民党军队。杏花决定嫁给王晓宝，然而婚礼前夕，她抛下新郎去营救误入歧途的张响。张响醒悟后重返武工队，这让没做成新郎的王晓宝妒火中烧，站在了革命与背叛的岔路口。

荒凉的美国西部，一条铁路正在修建中，由于铁路将穿过石脊镇，预感当地地价将大幅上涨的政客海德利（哈维•科曼 Harvey Korman 饰）计划将镇上居民…

曼恩是一名枪手，一位儿时的朋友告诉他，他的父亲几年前被他的母亲和她的情人谋杀了。更糟糕的是，曼恩的妹妹爱上了他的朋友，却被他凶残的妈妈控制着。两名持枪歹徒骑马离去，与她算账。

神枪手林浩天在一次刺杀执行中，发现要杀的人竟是多年前失散的亲弟弟林，而亲兄弟已是上海滩有权有势的大佬。兄弟相认，但弟弟已变成心狠手辣之人，两人之间也随之展开角逐。

Sartana is falsely accused of robbing a bank, and must find the real robbers and clear his name.